猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）使用说明书

产品信息

产品名称：
通用名：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)

包装规格

本试剂盒提供以下规格：
96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途

猪瘟由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus, CSFV）引起，是一种高度传染性的致死性传染病，特征包括高热及因微血管壁变性导致的广泛出血和坏死。该试剂用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体，适用于评估猪瘟病毒疫苗的免疫效果。

原理

本试剂盒基于酶联免疫法（ELISA）原理，包含预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物和其他配套试剂。实验过程中，待检样本与抗原结合，经清洗后加入酶标记物，形成复合物。后续通过底物反应生成蓝色产物，反应程度与样品中的特异性抗体含量成正相关。最后通过加入终止液将反应转为黄色，利用酶标仪在450nm波长下测定吸光值，以检测猪瘟病毒抗体的存在。

试剂盒组成

请按说明书进行储存，采用2～8℃保存，有效期为12个月。开启的包被板须在2～8℃避光保存，使用期限为2个月。

适用仪器

检测需要的仪器包括波长为450nm、630nm的酶标仪、37℃恒温设备以及可调微量移液器。

样品准备

1. 动物全血需按常规方法制备清亮的血清，无溶血和污染。样品可在2～8℃条件下保存1周，长期保存需置于-20℃。
2. 用样品稀释液将待检血清按40倍稀释，注意阴阳性对照不需稀释。
3. 浓缩洗涤液在使用前须恢复至室温并用蒸馏水或去离子水稀释至20倍，形成工作洗涤液。

检验方法

1. 使用前将试剂盒置于室温30分钟。
2. 取合适酶标板条，并设置阴性和阳性对照孔各2孔。
3. 向阴阳性对照孔分别加入100μl控液；样品孔则加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀并覆盖膜，置于37℃避光反应30分钟。
5. 清洗后加入350μl工作洗涤液，每孔静置30秒后弃去，重复5次清洗。
6. 向每孔加入100μl酶标记物，封膜，在37℃避光反应30分钟。
7. 清洗，按照前述步骤进行。
8. 向每孔加入底物液A和B各50μl，混匀，置于37℃避光反应10分钟。
9. 最后加终止液50μl，混匀并测定各孔的吸光值。

参考值与结果判定

在正常实验条件下，阴性对照平均OD值≤0.3，阳性对照平均OD值≥0.6。样品OD值_DS计算SP值：SP值 = (OD_DS - OD_NC) / (OD_PC - OD_NC)。若SP值≥0.2，结果判定为阳性；SP值<0.2，须判定为阴性，建议补打相关疫苗。

注意事项

1. 操作时需佩戴手套与工作衣，严格遵守消毒隔离制度，处理实验废弃物时需按传染物处理。
2. 终止液具有腐蚀性，避免皮肤和衣物接触，若不慎接触请及时冲洗。
3. 酶标板从冷藏环境取出后需恢复至室温，未用完的板条应存放于含干燥剂的密封袋中。
4. 浓缩洗涤液需在室温下使用。
5. 测试样品须保持新鲜，实验结果的判断以酶标仪读数为准。
6. 不同批次的试剂不得混用。

该试剂盒由ag尊龙凯时品牌提供，作为专业的生物医疗设备解决方案，确保您的检测结果精准可靠，助力健康养殖。